DOI: 10.31082/1728-452X-2020-217-218-7-8-20-28
УДК 616.98; 577.212.3
К ПРОБЛЕМЕ ДИАГНОСТИКИ БРУЦЕЛЛЁЗА: РАЗРАБОТКА СИСТЕМЫ ПРАЙМЕРОВ ДЛЯ МУЛЬТИПЛЕКСНОЙ ПЦР
Айгуль А. АБДИРАСИЛОВА, https://orcid.org/0000-0001-7308-2113,
Алтынай К. КАСЕНОВА, https://orcid.org/0000-0002-5557-2909,
Алтын К. РЫСБЕКОВА, https://orcid.org/0000-0002-8684-3425,
Думан Т. ЕСИМСЕЙТ, https://orcid.org/0000-0003-2202-9333,
Бек З. АБДЕЛИЕВ, https://orcid.org/0000-0002-4184-6227,
Зият Ж. АБДЕЛ, https://orcid.org/0000-0003-4446-140X,
Марат С. СЫЗДЫКОВ, https://orcid.org/0000-0003-1438-2145,
Андрей Н. КУЗНЕЦОВ, https://orcid.org/0000-0003-2354-533X,
Токтасын К. ЕРУБАЕВ, https://orcid.org/0000-0001-8894-3326,
Галина Г. КОВАЛЕВА, https://orcid.org/0000-0002-2673-2213
РГП на ПХВ «Национальный научный центр особо опасных инфекций им. М. Айкимбаева», г. Алматы, Республика Казахстан

По данным ВОЗ, ежегодно регистрируется более 0,5 млн. случаев бруцеллёза среди населения 73 стран мира. По тенденции распространения бруцеллёза Казахстан относится к гиперэндемичным странам. Хотя бактериологический посев и остается «золотым стандартом» лабораторной диагностики, диагноз бруцеллёза подтверждается результатами посевов только в 15-24% случаев. Эффективность иммунологических методов диагностики снижается из-за недостаточной специфичности. Проблему решает внедрение генетического метода – ПЦР.
Цель исследования. Совершенствование системы лабораторной диагностики бруцеллёза, для детекции в мультиплексной ПЦР с целью идентификации микроорганизмов рода Brucella до видов.
Материал и методы. В работе использовали референтные и вакцинные штаммы бруцелл из коллекции музея живых культур ННЦООИ. В качестве основного метода использовался метод молекулярной диагностики – ПЦР.
Результаты и обсуждение. Получены три пары праймеров фланкирующие фрагменты в 428 (Br1), 329 (Br2) и 179 (Br3) нуклеотидных пар.
Выводы. Разработанная тест-система из набора праймеров Br1 + Br2 + Br3 на основе нуклеотидных последовательностей генов BCAN_B0369, BSPT1_II0384 и BruAb1_0072 дала возможность дифференциации штаммов до видов B. abortus, B. melitensis и B. suis, и экспериментальная серия препарата показала высокую специфичность.

Ключевые слова: бруцеллез, бруцеллы, молекулярная диагностика, ПЦР, праймер.

скачать